色谱柱常见问题解答

色谱柱常见问题解答
溶解性不好的样品
      如果样品不溶于流动相中的有机溶剂怎么办，按照化学合成人员的溶解性测试，的确有些样品不能完全溶解在甲醇或者乙腈中，可是对于分析测试用的样品浓度来说，样品不太可能不溶于相同的溶剂中。如果样品在分析用浓度水平不能溶解的话，它怎么能在分析过程中从色谱柱上被洗脱出来呢？对于极少数情况，样品在水-有机溶剂中的临界浓度对其溶解性很重要。但是对于好的液相色谱系统，比较倾向样品溶解在流动相中，并会被流动相洗脱出来。大多数色谱柱的清洗方法关注的不是样品如何从色谱柱洗脱下来，而是如何将样品所带来的污染物从色谱柱上清洗掉，那么采用强溶剂将是最好的选择。

可以采取强溶剂冲洗吗
      有些色谱工作者喜欢用一些洗脱能力比流动相中强溶剂更强的溶剂来清洗色谱柱，例如，在用乙腈冲洗色谱柱后，采用二氯甲烷或甲基叔丁基醚或者DMSO冲洗。的确这样做可以出去一些强吸附在色谱柱上的污染物，但有时要考虑值不值得。我们从经济的角度考虑一下：对于制药行业来说，一般一个LC-UV的分析大约要花费50美元。如果一个价值500美元的色谱柱可以持续运行500次进样的话，那么每一次进样花费1美元，是全部花费的2%。如果你用1小时来清洗色谱柱，并使其寿命延长一倍的话，你也只是节约全部费用的1%，这是一种很好的投资吗？我觉得如果一根色谱柱可以进样500次的话，就已经很值了。根据经验，即使是血样样品，色谱柱常常能经受2000次进样或者更多。色谱柱是消耗品，不是固定资产，即使它非常贵也仍然是耗材。