摘要
实验室使用不同的方法检测众多的医学检验项目。了解检测所使用的方法可以对检测结果有更深刻更广泛的认识。以下是对几种常见的实验室检测方法的解释和说明。
内容
实验室使用不同的方法检测众多的医学检验项目。了解检测所使用的方法可以对检测结果有更深刻更广泛的认识。以下是对几种常见的实验室检测方法的解释和说明。
实验室检测方法的建立是涉及生物学、化学和物理学等科学的理论基础,并涵盖从检测血液中胆固醇的含量、到分析DNA、再到培养可能导致感染的微生物病原体的临床实验室等所有方面。这些方法与烹饪方法很相似,用于确定待测生物样品中的特定组份。实验室工作人员遵循程序一步步操作,直到得到最终结果。
像一些食谱一样,有些方法比其他方法更复杂,并且需要不同程度的专业知识。通常情况下,同一物质可以有一种以上的方法被用于检测。因此,在不同的实验室同一样品可能使用不同的检测方法,在比对检测结果时,事实是至关重要的。
以下所罗列出的一些方法尝试对一些科学的检测原理和得出结果所必须的一些步骤进行说明。对一些方法及其之间差异的解释说明,能更好地让你理解以后会使用到的检测试验。这些项目的目的并不是要提供一个全面的可使用的方法,但是这些项目确实能够代表这里将提及的一些方法。
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免疫学检测
免疫球蛋白是由免疫系统产生的一种能对体内外来物质识别、结合、消除的蛋白质。免疫学检测的基础是在免疫球蛋白(抗体)与其特异识别的物质(外来分子,称为抗原)之间进行特异性结合。免疫学检测可应用于检测血液或其他体液中是否有特异性抗体或特异性抗原的存在。
当免疫学检测方法用于检测血液或体液中是否存在抗体时,那么检测试验中需要一个特异性抗原作为检测系统的一部分。如果被检测样品中存在抗体,那么它将与检测系统中的抗原反应或结合,检测结果也呈现阳性。如果没有明显的反应,测试结果为阴性。免疫学检测抗体的应用包括类风湿因子(该试验检测类风湿关节炎患者中是否存在自身免疫性抗体)、西尼罗河病毒(该试验检测受感染的患者体内是否存在该病毒抗体)及一些预防接种后产生的抗体(如检测乙肝表面抗体,以确保乙肝疫苗接种是成功的)。
当免疫学检测方法检测血液或体液中是否存在抗原时,检测中包含与抗原相对应的抗体。患者样品中出现的抗原与特异性抗体的反应与一些已知的反应浓度进行比较,最后得出抗原的浓度含量。免疫学检测抗原的应用试验包括检测药物浓度(如地高辛、万古霉素)、激素(如胰岛素、甲状腺激素、雌激素)和肿瘤标志物(如PSA、CA125和AFP)。
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酶联免疫检测
这是免疫学检测的方法之一。其检测原理为抗体与特异性抗原结合形成抗原抗体复合物,再通过酶标记的抗原或抗体来检测这些复合物。
为检测患者血液中某一抗体,一个已知的抗原需要附着在固相载体表面,然后加入含有病人标本的溶液。如果病人的样本中含有抗体,那么它就会与抗原结合。随后添加酶标记的第二抗体(抗人抗体)。如果酶标记的抗体与抗人抗体结合,那么酶将会发生一些可检测到的变化,表明病人样本中存在相对应的抗体和该抗体的含量。
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这是一种免疫学检测方法来检测病人血液或组织中一些特定的蛋白质。它整合了电泳的步骤,将特定的蛋白质转移到薄膜上。蛋白质印迹检测方法往往作为一个确诊试验以确认抗体的存在,并作为诊断标准之一。其应用的例子包括艾滋病和莱姆病的确诊试验。
进行蛋白质印迹试验时,沿着凝胶的一端加入含有蛋白质的样品。多个样品及一个质控品可并肩加入在凝胶一端不同的“泳道”中。通过电流,可以使样品中的蛋白质在凝胶介质中移动,根据蛋白质大小和形状的不同进行分离,最终形成类似梯子样的条带。这些样品和质控品形成的梯子样条带随后通过薄膜与凝胶的接触,转移到薄膜上。标记的抗体在随后的一到两个步骤中被用于检测薄膜上是否存在结合的蛋白质。例如,在艾滋病或莱姆病确诊检测中,分离的蛋白质实质是病原体。病人的样本加入以杂交,任何针对病原体的的抗体都会被结合,最后通过被标记的针对人免疫球蛋白抗体来检测。某些蛋白质的出现可以通过与其他泳道质控品阳性或阴性的对比进行判断说明。
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