摘要
MA-1智能卡尔费休水分测定仪测定依托泊苷中水分
内容
依托泊苷为细胞周期特异性抗肿瘤药物,分子式为C29H32O13,作用于DNA拓扑异构酶Ⅱ,形成药物-酶- DNA稳定的可逆性复合物,阻碍DNA修复。实验发现这复合物可随药物的清除而逆转 ,使损伤的DNA得到修复,降低了细胞毒作用。因此,延长药物的给药时间,可能 提高抗肿瘤活性。
仪器和试剂:
1.MA-1智能卡尔费休水分测定仪
2.万分之一电子天平
3.10ul微量进样器
4.容量法卡尔费休试剂
5.无水甲醇
步骤:
1.吸甲醇:打开仪器电源开关,屏幕显示主菜单,再点击“吸甲醇”键,界面进入吸甲醇项,长按该界面“吸甲醇”键,仪器开始向反应杯中吸入甲醇状态,此时应将加料孔瓶塞放松(以甲醇液面浸没电极两电极柱位置结束)。
2. 吸液:点击“手动控制”键出现新的界面后再点击“吸液”键,然后点击“确定” 键,仪器开始将卡尔费休试剂吸入计量管,直至到达下限时自动停止(吸液时三通转换阀自动转入吸液状态,吸液停止后仪器自动反转,三通阀再转入注液状态),界面退至手动控制状态;
3.打空白:点击“手动控制”键出现新的界面后再点击“打空白”键,然后点击“确 定”键,此时仪器进入打空白(甲醇内的水分)状态,同时将第一次吸液中计量管中的空气打空,空白打完后仪器自动结束并提示打空白结束。点击“取消”键,界面退至手动控制状 态,再按“取消”键,界面退至主菜单;
4. 标定:点击“标定”键,然后用 10μl 微量注射器向反应杯中注入 10μl (10mg)蒸馏 水,点击“确定”键,仪器开始对卡尔费休试剂进行标定。可连续标定五次,仪器会将标定结果 自动存入系统内存并计算出平均值。待结束后,按“取消”键,界面退至主菜单;
5.称量依托泊苷用万分之一天平称量,精确到 0.0001g
6. 样品检测:点击主菜单“自动 检测”键,把已称重的依托泊苷输送到反应杯中,并输入样品的重量,按确定键,仪器开始滴定,自动到终点,并自动计算样品的含水量,3次测量取平均值。
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