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  • 柱清洗与再生的推荐步骤

    发布于 2014/11/12阅读(3464)来源 hj1

    摘要

    柱清洗与再生的推荐步骤

    内容

    柱清洗与再生的推荐步骤
          压力升高,色谱柱峰形发生变化如出现严重拖尾、肩峰甚至峰分岔,分离度降低,这些都强烈提示色谱柱受到污染。可采用以下步骤处理:如系统接有在线过滤器和保护柱,首先排查在线过滤器与保护柱,进行更新替换。日常操作中,当压力升高10%或柱效降低10%时,就应考虑更换在线过滤器和/或保护柱。
          使用高比例的有机溶剂进行冲洗(请注意避免盐析出,通常可使用梯度升高法,然后维持在高比例甚至100%有机溶剂条件下)。此操作通常可洗去大部分污染物。如有机溶剂清洗不能解决问题,可采用如下方法进行色谱柱的清洗和再生。根据样品性质以及你所了解的污染物性质选择清洗方法,用20倍柱体积(即,对于4.6x250 mm柱,相当于80 mL)的HPLC级溶剂清洗色谱柱,将流动相温度升至35-55?C可提高清洗效率。

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