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  • 磷的测定方法

    发布于 2011/11/07阅读(1375)来源 zxj标签 分光光度计

    摘要

    原理 食物中的有机物经酸氧化分解,使磷在酸性条件下与钼酸铵结合生成磷钼酸铵。

    内容

     此化合物经对苯二酚、亚硫酸钠还原成兰色化合物--钼蓝。用分光光度计在波长660nm处测定钼蓝的吸光值,以测定磷的含量。反应式为:
    H3PO4+12(NH4)3MoO4+21HNO3→(NH4)3PO4·12MoO3+21NH4NO3+12H2O

    2.      适用范围
    依据中华人民共和国国家标准:GB12393-90, 此方法适用于所有食品及保健品中磷元素含量的测定。

     

    3.      仪器
    722可见分光光度计

     

    4.      试剂
    (1) 硝酸(G.R), 高氯酸(G.R) 硫酸(A.R)
    (2) 混合酸消化液:硝酸+高氯酸 按4+1混合
    (3) 15%(V/V)硫酸溶液:取15ml硫酸缓慢加入到80ml水中,并定容至100ml。
    (4) 5%(W/V)钼酸铵溶液:取5g钼酸铵,用15%硫酸溶液稀释至100ml。
    (5) 对苯二酚溶液:取0.5g对苯二酚于100ml水中,溶解后加一滴浓硫酸。
    (6) 20%(W/V)亚硫酸钠溶液(注:此溶液需在每次实验前临时配制):称取一定量的亚硫酸钠,用蒸馏水溶解即可。
    (7) 标准质控物:猪肝粉(国家标准物质研究中心提供),质控物需室温干燥保存。
    (8) 国家标准物质中心提供:磷标准储备溶液,浓度为1000μg/mL
    (9) 标准中间液的配制:吸取1ml磷标准储备溶液,然后移入100ml容量瓶中,用去离子水定容至100ml ,浓度为10mg/L

     

    5.      操作步骤
    5.1样品消化:实验操作需在无元素污染的环境中进行。准确称取样品干样(0.3-0.7g左右),湿样(1.0g左右),饮料等其他液体样品 (1.0-2.0g左右),然后将其放入50ml消化管中, 加混酸15ml(油样或含糖量高的食品可多加些酸),过夜。次日,将消化管放入消化炉中,消化开始时可将温度调低(约130℃左右),然后逐步将温度调高(最终调至240℃左右)进行消化,一直消化到样品冒白烟液体变成无色或黄绿色为止。若样品未消化完全可再加几毫升混酸,直到消化完全。消化完后,待凉,再加5ml去离子水,继续加热,直到消化管中的液体约剩2ml左右,取下,放凉,然后转移至10ml试管中,再用去离子水冲洗消化管2-3次,并最终定容至10ml。
    样品进行消化时,应同时做样品空白消化。
    5.2磷标准曲线:分别吸取标准储备液1.0ml、3.0ml、5.0ml至20ml刻度试管中,然后依次加入2ml钼酸铵溶液、1ml亚硫酸钠溶液、1ml对苯二酚溶液,加蒸馏水定容至20ml,混匀,静置30分钟,在波长660nm处测定其吸光度,由此计算出回归系数,利用回归方程计算或绘制成校正曲线。
    5.3测定:取样品及空白液各2ml分别至20ml试管中,然后依次加入2ml钼酸铵溶液、1ml亚硫酸钠溶液、1ml对苯二酚溶液,加蒸馏水定容至20ml,混匀,静置30分钟,在波长660nm处测定其吸光度,并根据测出的吸光度在标准曲线上算得未知溶液中的磷含量。

     

    6.      计算
    X (mg/100g) = (C∕m )×(V1∕V2 )×100
    式中:X----样品中磷含量,mg/100g
    C----由标准曲线及回归方程算得样品测定液中磷含量,mg
    m---称样量 g
    V1---消化液定溶总体积,ml
    V2-测定用消化液的体积,ml
    此元素最低检出限为2μg

     

    7.      注意事项
    (1) 亚硫酸钠溶液最好每次实验前临时配制,否则可能会使钼蓝溶液发生浑浊。
    (2) 其次定容完后,静置时间不亦过长,否则溶液颜色将会加深,其结果不准确。

     


     

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